1962年底,周小斌出生于齐齐哈尔,父母都是齐齐哈尔铁路文工团的文艺工作者。四岁时,周小斌随父母来到远郊昂昂溪。周小斌从事演员这行,还是受父亲的影响,父亲周斌是哈尔滨铁路局文工二团副团长兼导演。在父亲的熏陶下,周小斌和弟弟周小刚先后踏入了演艺圈。他1979年考入齐齐哈尔话剧团学员班,后在齐齐哈尔话剧团干了十几年,期间,他还被哈尔滨儿艺借调,在哈尔滨一年多。1993年,他考入中央戏剧学院表演干部进修班,1995年结业后分配到空政话剧团。
周小斌的女儿2005年出生。
参加活动2009年,周小斌与蔡明合作拍摄旨在宣传“家电下乡”国策的公益片《咱家该买了》。2009年7月10日下午,周小斌出席“中影集团电影惠民”系列公益活动在中影集团举行的启动仪式,并担任形象大使。2009年10月27日,周小斌出席主演电影《潘作良》在香港慈善首映礼。首映礼收益将拨归香港青少年发展联合会德育发展中心作青少年培训课程之用。2015年12月20日,周小斌出席第五届北京国际微电影节颁奖礼,并与张丰毅一同为凭借微电影《爸爸妈妈的橡树》获得最佳男主角奖的郑昊颁奖。